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多肽聚合酶链式反应的名词解释

聚合酶链式反应有多肽聚合酶链式反应,那么多肽聚合酶链式反应的名词解释是什么呢?

多肽聚合酶链式反应又称“体外的基因扩增”是由美国某公司和加利福尼亚大学于1985年共同合作开发的一项基因工程技术。这一技术可以在几个小时内将pg(10-9g)水平的单链拷贝序列扩增至上百万倍,已广泛的在于多领域得到了应用。近些年来,PCR技术得到了不断的完善,并衍生出了多种PCR技术(如反向PCR、多重PCR等技术)以及与PCR技术相关联的其它新技术(如RAPD、AFLP等分子标记技术)。

本身肽是α-氨基酸以肽键连接在一起而形成的化合物,是蛋白质水解的中间产物。由两个氨基酸分子脱水缩合而成的化合物叫做二肽,同理类推还有三肽、四肽、五肽等。由三个或三个以上氨基酸分子组成的肽叫多肽。

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多肽聚合酶链式反应操作过程

多肽聚合酶链式反应不难操作的,具体多肽聚合酶链式反应操作过程什么呢?

多肽聚合酶链式反应操作过程:先模板DNA的变性:模板DNA经加热至94℃左右一定时 聚合酶链式反应间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至40~60℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合。

引物的延伸:DNA模板--引物结合物在DNA聚合酶的作用下,于72℃左右,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链重复循环变性--退火--延伸三过程,就可获得更多的“半保留复制链”,而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2~4分钟,2~3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。

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多肽聚合酶链式反应原理

多肽聚合酶链式反应是基因工程技术来的,那么多肽聚合酶链式反应原理是什么呢?

多肽聚合酶链式反应原理大概就是通过某种技术加温降温,加入适量特种物质,将对生物来说钥匙一样的dna,只需要几个钥匙齿痕就可以利用它的自我复制性不断扩展成了一大串以百万计的相关钥匙组,从而打开有关生物的各种大门,从而揭开关于该生物更多的秘密。

而一般肽中含有的氨基酸的数目为二到九,根据肽中氨基酸的数量的不同,肽有多种不同的称呼:由两个氨基酸分子脱水缩合而成的化合物叫做二肽,同理类推还有三肽、四肽、五肽等。由三个或三个以上氨基酸分子组成的肽叫多肽,它们的分子量低于10,000Da,能透过半透膜,不被三氯乙酸及硫酸铵所沉淀。也有文献把由2~10个氨基酸组成的肽称为寡肽(小分子肽);10~50个氨基酸组成的肽称为多肽;由50个以上的氨基酸组成的肽就称为蛋白质,换言之,蛋白质有时也被称为多肽。

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多肽聚合酶链式反应的局限性

多肽聚合酶链式反应不是什么情况都能做的,那么多肽聚合酶链式反应的局限性是什么呢?

多肽聚合酶链式反应所需的主要硬件是热循环仪,这是一种能够快速加热和冷却样品管的机器,并能在特定的时间内将样品管保持在精确的温度。尽管三十年的发展和竞争极大地改进了这些机器,但它们仍然相对笨重、耗电和昂贵。因此,作为现代分子生物学的一项关键性技术,多肽聚合酶链式反应仍然无法为一些教育工作者所使用,在许多偏远地区也无法使用。

还有多肽聚合酶链式反应的大多数热循环仪使用Peltier结来控制温度,Peltier结是一种能够在加热和冷却之间快速切换的热电装置。不幸的是,Peltier结效率低下,操作这些结点所需的元件使热循环仪变得笨重且耗电量大。

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