对有阴道炎症状或体征的女性，若在阴道分泌物中找到假丝酵母菌的芽生孢子或假菌丝即可确诊。可用0.9%氯化钠溶液湿片法或10%氢氧化钾溶液湿片法或革兰染色检查分泌物中的芽生孢子和假菌丝。由于10%氢氧化钾溶液可溶解其他细胞成分，假丝酵母菌检出率高于0.9氯化钠溶液。

若有症状而多次湿片法检查为阴性；或为顽固病例，为确诊是否为白假丝酵母菌感染，可用培养法。pH测定具有重要兼备意义，若pH<4.5，可能为单纯假丝酵母菌感染，若pH>4.5可能存在混合感染，尤其是细菌性阴道病的混合感染。