rna聚合酶链式反应操作过程
收藏rna聚合酶链式反应操作得当才准确，那么rna聚合酶链式反应操作过程是什么呢？
rna聚合酶链式反应定量方法包括PCR反应和转录反应二个步骤，二个步骤相互接续，可以只用一个试管来完成，先用PCR来扩增目标基因，但PCR循环数比通常少5-10个循环，虽然此时反应液中扩增产物的总量较少，不能直接用通常的核酸染色剂来定量测定，但因为PCR反应仍处在直线阶段未进入平坡期，所以扩增产物总量与样品中原始模板的数量成正比例。其在于用转录反应使PCR扩增产物进一步按线性增加的方式合成RNA。这一设想能付之实现的基础是发现PCR反应液的必要成份脱氧核糖核苷酸，正，反引物和DNA聚合酶等在相当宽的浓度范围内对转录反应没有可测见的显著影响。
所以，在完成PCR反应后可以不经过任何分离步骤而进入转录反应。在RNA聚合酶和核糖核苷酸底物过量，反应温度和时间固定的条件下，RNA的合成量与转录反应的模板数量，即PCR扩增产物的数量成正比例，所以，最终合成的RNA量反映了样品中原始模板DNA的数量。由转录反应合成的RNA量可达到模板数量的几百至千倍，从而可以方便地用溴乙锭或其他核酸染色剂定量测定。
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