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甲胎蛋白异质体是什么

2014-11-10 12:02:34出处:PCbaby作者:佚名

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  人体的肝脏是最重要的器官之一,各种类型的肝病严重威胁着人们的身体健康,都说肝病无小事,所以及时做好各种肝病的诊断是极为重要的。一些朋友就需要做甲胎蛋白异质体检测,甲胎蛋白异质体是什么呢?

甲胎蛋白异质体是什么

  甲胎蛋白(Alpha-fetoprotein, AFP)是一种含有2条复合糖链的胚源性糖蛋白,60年代起,就将其作为肝脏恶性肿瘤的标志物。许多儿科疾病能引起AFP升高,但不同疾病导致的AFP升高,由于来源不同,其分子在糖链结构的亚结构上表现不同。这种结构上的差异,常称AFP异质体(Alpha-fetoproteine heterogeneity)。可利用具有结合糖专一性的植物凝集素与AFP不同的亲和力将其来源予以判别。我们对一组年龄<12岁,患有不同疾病,且伴有AFP值升高的病儿应用亲和交叉免疫电泳自显影术检测AFP异质体,以探讨其对儿科鉴别恶性肿瘤等疾病的应用价值。

  除正常新生儿血清中甲胎蛋白可升高外,在儿童可导致甲胎蛋白异常升高的疾病较多。但主要有下列3类:

  (1)良性肝脏疾病:如肝炎、胆道闭锁肝脏损伤、肝硬化。

  (2)肝脏恶性肿瘤:如肝母细胞瘤、原发性肝细胞癌。

  (3)恶性胚芽细胞肿瘤:卵黄囊瘤、胚胎癌、恶性畸胎瘤。

甲胎蛋白异质体测定

  1、称取5mg ConA加入0.2 ml缓冲液溶解,置56℃预温,再加入已预温至56℃的1%琼脂糖溶液5 ml,混匀,在6 cm×10cm玻璃板一侧浇注2cm×10cm的凝胶条。距阴极端1.5cm处加入50μl待检血清及3μl溴酚兰,纱布搭桥,平衡后作第一向亲和电泳(140 v, 1.5~2 h)。

  2、 吸取1%琼脂糖溶液10 ml,加0.12 ml AFP抗血清,混匀,浇注入玻板的剩余部分。再在第一向亲和电泳凝胶条上,血清电泳行径的阴极侧,切割0.3 cm×7 cm的狭槽,以含5~10 μl 125 I琼脂糖溶液充填,与第一向免疫电泳垂直做第二向免疫电泳(50 v, 16~18 h)。

  3、电泳结束后,将凝胶板置于80~90℃的水浴锅上烘干约1 h。在暗房中覆盖X胶片自行曝光48 h,冲洗成像。

  4、计算:在亲和交叉免疫电泳自显影图中通常可出现2个峰,靠近加样端峰为结合型AFP(R波),远离加样端峰为非结合型AFP(NR波)。干燥后将底片置于小方格纸上(每格1 mm2),计数两峰各自所占的小格数,按下式计算NR波的百分比:NR(%)=(NR波所占小格数)/(R波所占小格数+NR波所占小格数)×100%

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